Ülkemizde Adana yöresinden toplanan kırmızı biberlerde (Capsicum annuum l.) biber ve çekirdeğindeki kapsaisin miktarının tespit edilmesi ve kolon kanser hücreleri (caco-2) üzerine sitotoksik etkilerinin araştırılması
No Thumbnail Available
Files
Date
2020
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Abstract
Kolon kanseri, tüm kanseri insidansının % 9'undan fazlasını oluşturur ve sindirim kanalının son bölümü olan kalın bağırsakta (kolon) gözlenir. Kanser tedavisinde başlıca kullanılan yöntemler arasında cerrahi, kemoterapi, radyoterapi sayılabilir. Yaklaşık yüz yıldır kanserin sistemik tedavisi için yaygın olarak sitotoksik kemoterapötikler kullanılmaktadır. Bu ilaçların birçoğu, hızla çoğalan hücreleri öldürmek ya da engellemek için dizayn edilmiş, DNA hasarına sebep olan maddelerdir. Kapsaisinin karsinogenik potansiyelinin değerlendirildiği genotoksisite ve karsinogenez analizleri in vitro ve in vivo değişken sonuçlar göstermektedir. Ancak 2000 yılı itibariyle kapsaisinin antikarsinojen yönünün olduğu ve saflığının önemli olduğu standardize protokollerle gösterilmeye başlanmıştır. Ancak apoptozun hangi moleküler mekanizmalar aracılığıyla uyarıldığı net olarak bilinmemektedir. Bazı sonuçlar, kapsaisinlerin normal hücrelerden kanserli hücreleri ayırabildiğini gösteriyor olsa da bunun nasıl gerçekleştiği hala belli değildir. Bu sebeple bu tez çalışmasında öncelikle; Ülkemizde kırmızıbiberin yaygın olarak üretiminin yapıldığı Adana İlinden toplanan olan C. annum L. cinsi biberlere ve çekirdeklerine uygun ekstraksiyon yöntemi geliştirilerek ve HPLC sistemi ile içerdikleri kapsaisin miktarları belirlenmesi amaçlandı. Daha sonra biber, çekirdek ve ticari kapsasin Caco-2 hücre hattı üzerine uygulanıp konsantrasyon ve zamana bağlı, sitotoksik açıdan hücre canlılığına etkileri; ilaç uygulanmış hücrelerden elde edilen protein miktarlarına bağlı olarak hücrelere etki mekanizması araştırıldı. HPLC yönteminin koşulları diğer araştırmalarla karşılaştırılarak laboratuvarımızda uygulamaya mümkün olan en uygun yöntem olarak seçildi; elde edilen doğruluk, duyarlılık ve doğrusallık sonuçları hesapların güvenilir olduğunu kanıtladı (p <0,05). Elde edilen kapsaisin miktarı ise başka ülkelerde gerçekleştirilen araştırma bulgularıyla benzerlik gösterdi. Ancak ülkemizin herhangi bir bölgesindeki biberlerde kapsaisin miktarlarının gösterildiği herhangi bir çalışma örneği de bulunamadığı için çalışmamız Adana Bölgesi'nden ve Türkiye içerisindeki biber ve çekirdeğindeki kapsaisin miktarının ayrı ayrı gösterilmesi açısından bir ilk olarak gösterilebilir. Son yıllarda tüm dünyada bitkiler üzerinde klinik amaçlı ve salgın hastalıkların kontrolü yönünde çalışmalar sürdürülmekte, çeşitli enzim sistemleri kullanılarak, bitkilerden biyoaktif maddelerin bulunması için ileri düzeyde çalışmalar yapılmaktadır. Çalışma kapsamında in vitro denemelerde ilk olarak kapsaisinin kanser hücreleri üzerine sitotoksik etkileri gözlenmiştir. Hücrelerin 24 saatlik morfolojik incelemeleri kapsaisinin Caco-2 kolon karsinoma hücrelerinin proliferasyonunu kanıtlamaktadır. Ayrıca MTT testi ile IC50 değerleri kapsaisin için 104.23 uM biber ve çekirdek ekstraktı için sırasıyla 24.84 ve 26.06 uM olarak hesaplanmıştır. İstatistiki sonuçlar bulguların anlamlı olduğunu teyit etmiştir. Western Blot sonucuna göre bax protein pozitif bulunmuşken, survivin negatif bulunmuştur.
Description
Keywords
Kolon kanseri, sitotoksik kemoterapötikler